今日，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)在Scientific Reports上發(fā)表了多位點(diǎn)CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在甘藍(lán)型油菜中的應(yīng)用。題目為： CRISPR/Cas9-mediated genome editing efficiently creates specific mutations at multiple loci using one sgRNA in Brassica napus .
CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在許多植物物種中都得到廣泛的應(yīng)用，但是在四倍體甘藍(lán)型油菜中還沒有高效的編輯系統(tǒng)。在本研究中，探索了CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)對12個(gè)基因突變效率，并確定了這些基因編輯在甘藍(lán)型油菜中的模式、特異性和遺傳力。從表1中的數(shù)據(jù)來看，T0代單基因靶點(diǎn)的平均突變率達(dá)到65.3%。從表2中的數(shù)據(jù)來看，將sgRNAs的靶標(biāo)設(shè)計(jì)到同源基因的保守區(qū)域，突變的頻率范圍從27.6%到96.6%。并且很容易發(fā)現(xiàn)純合子植株。包括雙等位基因純合子，雜合子在內(nèi)的48.2%的基因突變可以穩(wěn)定遺傳，并作為經(jīng)典的孟德爾基因在下一代（T1）沒有任何新的突變或逆轉(zhuǎn)。此外，在所檢測的T0植物中，在預(yù)測的脫靶位點(diǎn)沒有發(fā)現(xiàn)突變。研究結(jié)果表明，CRISPR/Cas9是創(chuàng)建有針對性的基因組修飾在多個(gè)位點(diǎn)的穩(wěn)定和甘藍(lán)型油菜的遺傳的有效工具。這些發(fā)現(xiàn)為油料作物生物技術(shù)應(yīng)用開辟了許多途徑。
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